组织蛋白提取

组织蛋白提取¶

实验准备
EP管、冰盒、RIPA裂解液、PMSF、SDS loading
研磨仪器、高速离心机、涡旋仪、金属浴
预冷
研磨仪、离心机、金属浴
试验步骤
RAPA : PMSF = 100:1
每个样本加300微升，加4个研磨珠
从-80摄氏度取出样品，冰上进行，剪取30mg左右组织块
研磨。70HZ，研磨1min。可根据淹没状况，增加次数
研磨结束后，裂解20min
离心。12000转，4摄氏度，离心20分钟
取上清到新的EP（1.5ml）管中,不要吸到沉淀，吸取时，尽量保证吸取总量一样，不要贪
加入Loading，100摄氏度（膜蛋白用37摄氏度，也可能是60；70摄氏度）煮半小时
-80摄氏度保存。